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玻璃板洗涤方法

2015-07-18

玻璃板的处理:银染测序的玻璃板一定要非常清洁。实验过程中,先用温水和去污剂洗涤,再用去离子水冲洗玻璃板,除去残留的去污剂,**用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高。每次铺胶前均需分别严格处理长玻璃板和短玻璃板。 


(1)长玻璃板的处理 


a) 用浸透亲和硅烷溶液(1ml左右)的镜头纸擦拭清洗过的长玻璃板。长玻璃板经粘合溶液处理可将凝胶化学交联于玻璃板上; 


b) 五分钟后用吸水棉纸沾95%乙醇洗长玻璃板3次,以除去多余Sigmacote溶液。 


(2)短玻璃板的处理 


a) 更换手套,避免与亲和硅交叉污染;

 

b) 用浸透剥离硅烷溶液(1.5ml)的镜头纸擦拭清洗过并已经自然干燥的整个玻璃板板面; 


c) 五分钟后,用干净纸头单向擦玻璃板,然后略用力沿垂直方向擦拭。重复三次,每次均须换用干净的纸,以除去多余的粘合溶液; 


d) 实验中根据温度等实际情况调整剥离硅烷的涂量。这一步对于在银染操作过程中防止凝胶撕裂至关重要。


(3)测序板处理的注意事项

 

a) 在单向擦玻璃板时不要过度用力,否则会带走过多粘合


硅烷,使凝胶不能很好地粘附;

 

b) 一定要更换手套,防止粘染粘合硅烷,否则将导致凝胶撕裂; 


c) 用过的凝胶可在水中浸泡后用剃须刀片或塑料刮刀刮去。玻璃板须用去污剂完全清洗。或者凝胶用10% NaOH浸泡30~60min后除去; 


d) 为防止交叉污染, 用于清洗短玻璃板的工具**与清洗长玻璃板的工具分开, 如果出现交叉污染, 以后制备的凝胶可能撕裂或变得松驰。